再深点灬舒服灬受不了了视频,熟妇人妻无码XXX视频,精品国产一二三产品区别在哪,99久久99久久免费精品小说

當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  支原體常規(guī)檢測(cè)方法匯總~之二

支原體常規(guī)檢測(cè)方法匯總~之二

更新時(shí)間:2021-11-24  |  點(diǎn)擊率:766

上周我們一起討論了基于Venor®Gem qEP試劑盒的支原體qPCR經(jīng)典檢測(cè)法,也是目前使用比較廣泛的方法之一。

當(dāng)然啦,關(guān)于支原體的檢測(cè),方法眾多。今天我們就來(lái)了解一下,操作相對(duì)更簡(jiǎn)單的“一步法"。該方法會(huì)用到Minerva Biolabs公司的另一種試劑盒——VenorGeM® OneStep,它與上周介紹的經(jīng)典法試劑盒類似,都是利用了熒光定量PCR的基本原理。

(前情提要在這里,戳戳下方圖片傳送到經(jīng)典法支原體檢測(cè)試劑盒詳解)

A1.png

不同的是,“一步法"試劑盒中,直接將內(nèi)控添加到預(yù)混液中,使用起來(lái)更加方便、節(jié)省時(shí)間。

下面我們就來(lái)詳細(xì)介紹一下VenorGeM® OneStep支原體檢測(cè)試劑盒。??

A2.png

使用方法

步驟

與經(jīng)典法大致相同:

樣品處理?試劑制備?體系建立?啟動(dòng)PCR反應(yīng)?結(jié)果判定

樣品處理:

取100μl左右的細(xì)胞上清液

95℃孵育后離心,取適量用于后續(xù)qPCR。

A3.png

細(xì)胞培養(yǎng)樣品易含豐富的DNA酶,在低溫下也能降解支原體DNA。因而推薦進(jìn)行樣品穩(wěn)定化處理。

試劑制備:

將緩沖液、預(yù)混液、陽(yáng)性對(duì)照等試劑按照說(shuō)明書要求,該離心的離心、該混合的混合,處理好后扣緊蓋子備用。

A4.png

PCR體系建立:

在PCR管中,根據(jù)需要,加入樣品、陽(yáng)性對(duì)照、新鮮培養(yǎng)基(陰性對(duì)照),并且設(shè)置好重復(fù)孔,蓋好蓋子,震蕩混勻。

A5.png

啟動(dòng)PCR反應(yīng):

按照所需參數(shù),設(shè)置好PCR儀,啟動(dòng)程序(具體參數(shù)詳見(jiàn)產(chǎn)品使用說(shuō)明或是締一生物網(wǎng)站,點(diǎn)擊下方閱讀原文即可)。

A6.png

FAM通道:檢測(cè)支原體熒光信號(hào)。

HEX通道:檢測(cè)內(nèi)控對(duì)照熒光信號(hào)

支原體DNA和內(nèi)控DNA,存在信號(hào)之間的競(jìng)爭(zhēng)性抑制

支原體DNA越多,F(xiàn)AM通道信號(hào)越高

檢測(cè)內(nèi)控對(duì)照的HEX信號(hào)通道信號(hào)越低。

定量需要基于Ct值和DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線

Ct<40為陽(yáng)性結(jié)果。Ct≥40為陰性結(jié)果。

A7.png

小結(jié):

總的來(lái)說(shuō),一步法試劑盒是經(jīng)典版試劑盒的升級(jí)版。

在以下幾個(gè)方面都是相同的:

①都具有高特異性:一次即可涵蓋所有常見(jiàn)易感染細(xì)胞的支原體物種(包括歐洲藥典規(guī)定的9種支原體)。與細(xì)菌和真核DNA無(wú)交叉反應(yīng)。

②都具有高靈敏度:最高檢測(cè)限可達(dá)到10CFU/ml。

③都具有相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA,便于特異性驗(yàn)證。

④都有相應(yīng)配套的支原體絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品,便于最后定量檢測(cè)。

不同之處在于,一步法試劑盒省去了配置內(nèi)控對(duì)照的環(huán)節(jié),為實(shí)驗(yàn)人員節(jié)省了寶貴時(shí)間,但相應(yīng)的,價(jià)格也會(huì)比經(jīng)典法試劑盒高出一部分。



又湿又紧又大又爽又A视频| 久久久久人妻精品一区二区三区| 少妇极品熟妇人妻高清性色av| 亚洲欧美另类激情综合区蜜芽| 精品人体无码一区二区三区 | 少妇一夜三次一区二区| 无码高潮少妇毛多水多水免费| 无忧传媒剧国产剧情mv| 亚洲处破女a片出血| 亚洲白嫩小受男同gv在线观看| 国产精品亚洲一区二区三区在线| 欲求不満な人妻は毎晩隣人に| 少妇被躁爽到高潮无码人狍大战| 亚州日本乱码一区二区三区| 亚洲av无码成人精品区在线观看| 久久久无码精品亚洲日韩| 俺去俺来也在线www色官网| 国产成人精品a视频一区| 国产人久久人人人人爽| 九九久久精品无码专区| 国产av一区二区三区传媒| 性色a码一区二区三区天美传媒| 久久亚洲中文字幕伊人久久大 | 久久人人爽人人爽人人av东京热 | 亚洲日韩乱码久久久久久| 亚洲精品无码高潮喷水a片软| 五月丁香六月狠狠爱综合| 亚洲精品日本久久一区二区三区| 伊人久久大香线蕉综合75| 免费看美女被靠到爽的视频| 免费特级毛片| 果冻传媒在线观看九一制片厂| 国产精品视频23区AV| 一本色道无码不卡在线观看| 禁室培欲在线观看| 久久久国产精品无码一区二区 | 亚洲欧美精品suv| 东京热人妻系列无码专区| 国产精品大白屁股XXXXX| 免费又黄又爽又猛的毛片| 国产午夜精品一区二区三区漫画|